紫外分光光度計使用期間為了獲得準確的研究結果，準確測量樣品溶液的吸光度非常重要。通常，分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關。偶然誤差會影響測量精度，可通過足夠數量的統計處理來減少;系統誤差影響測量結果的準確性。
通過比較大致相同實驗條件下物質的準確測量結果，可以檢查和校正系統誤差(波長校正、分光光度計的慢像散、放大器的線性響應、暗電流和反應杯的光路)和操作誤差(溫度變化、儀器讀數、操作員變化、純度、所用物質的稱重和濃度、pH)的影響。在大多數情況下，通過嚴格遵守操作程序，將儀器調零并準確稱重，可以控制或減少操作誤差。通過定期校準分光光度計，可以克服儀器的系統誤差。如果需要高精度測量，必須每天校準。
紫外分光光度計在使用過程中需要定期清潔，確保環境衛生，注意防塵。操作環境中的浮塵和腐蝕性氣體會影響紫外分光光度計機械系統的靈活性，降低各限位開關、鑰匙和光電耦合器的可靠性和靈敏度，也會導致部分零件的鋁膜腐蝕。
使用過程中應注意防潮和防潮。溫度和濕度是影響儀器性能的關鍵因素。空氣中水分過多會使機械部件生銹，影響金屬鏡面的光潔度，并導致機械部件產生誤差可能會嚴重影響性能;鏡子、光柵、聚焦透鏡等光學元件的鋁膜可能生銹，也可能出現雜散光、光能不足、噪聲等故障。更嚴重的是，儀器可能無法運行，使用時間可能會縮短。因此，除了維護期間的定期校準外，還應配備一個四季恒濕的儀器室，并配備恒溫設備，尤其是在南方潮濕地區的實驗室。
使用儀器一段時間后，儀器內部會積聚一些雜塵。由專業維修技術人員或在工程師的指導下，定期打開儀表蓋，對內部灰塵進行清理和清除。此時，重新擰緊各加熱元件的散熱器，清潔光學盒的密封窗，清潔并潤滑機械部分，校準光路，在測試和校準前安裝儀器，使用前觀察儀器是否恢復正常。
